蛍光顕微鏡は、蛍光分子を用いて細胞や組織内の特定の分子の位置や活性を可視化する技術です。一方、カルシウムイメージングは、蛍光指標を用いて、細胞内の重要なシグナル伝達分子であるカルシウムイオン濃度の変化をモニターする技術です。どちらの技術も神経科学や細胞生物学の研究に不可欠なツールで、個々の細胞やネットワークの活動をリアルタイムで研究することができます。組織切片は、蛍光標識を使って簡単に可視化できる薄くて平らなサンプルを提供するため、イメージングに必要とされます。組織切片がなければ、個々の細胞やその活動パターンを同定・識別することは難しく、神経や細胞のシグナル伝達を研究することは難しくなります。
Compresstome®ビブラトームの利点
-
優れた形態：組織の安定化により、組織の構造的完全性が保たれます。
-
滑らかな切片：組織安定化＝アーチファクトなし
-
高速：圧縮による組織の安定化により、切片作製が格段に速くなります。
-
メンテナンスが簡単：オートZero-Zは、キャリブレーション不要のZero-Zを意味します。
-
使いさすさ：多くの研究室ではCompresstomeによって1回目または2回目で多くの生細胞を含む非常に滑らかなスライスを得ることができます。
従来の振動ミクロトームの問題点
-
形態の変化：組織の断裂、折れ曲がり、破砕により、組織に歪みが生じる。
-
スライス厚のばらつき：不均一な厚みはタンパク質の可視化に影響を与える。
-
切断アーチファクト：タンパク質染色に影響を与える明らかな切断アーチファクト。
-
メンテナンスとキャリブレーション：専門的な知識を必要とし、メンテナンスに時間がかかる。
-
習得の難しさ：特にIHCや組織前処理に慣れていないユーザーにとっては、完璧な結果を得るには多くの練習が必要。
Compresstome® 振動ミクロトーム
実験の質は、組織切片の質に左右されます。Compresstome® 振動式ミクロトームは、他の振動式ミクロトームと 比較して、免疫組織化学用の薄切片をより安定的に、より信頼性高く作製できる ことが科学的に証明されています。
Compresstome® の振動ミクロトームは、以下のような方法で、ビビリ痕のない安定した厚さの組織切片を作成します。
-
360度のアガロース包埋により、切断プロセス中に脳組織を安定化させる。
-
高速スライスを可能にすることで、連続切片作製の時間を短縮します。
-
高周波振動メカニズムにより、ビビリマークを低減または除去。
-
特許取得のAuto Zero-Z®テクノロジーにより、カッティングブレードのZ軸方向のたわみをなくすことで、ビビリマークを低減。
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームで切断した組織切片の比較画像
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームの切片の比較（A, C）。他社製ビブラトームで同じ切削速度と振動で組織スライスを作製した場合、組織スライスの表面にビビリマークが発生している。
イメージング - 推奨モデル
VF-510-0Z
振動ミクロトームCompresstome® VF-510-0Zは特許取得済みの圧縮技術によりビビリ・チャタリングなしで切片を作製し、急性組織上の多くの生存細胞を維持。良質な実験結果を保証します。
-
従来のビブラトームの5倍の速さで切開し、ブレードを組織に当てる時間を短縮し、より良い切開を実現
-
Auto Zero-Zテクノロジーにより、Z軸のたわみを1 µm未満に低減
-
持ち運びに便利な軽量設計
-
完全自動化：切開＋厚み調整
研究室での実例
免疫療法研究におけるCompresstome®の使用
Astero Klampatsa博士（PhD）は、英国ロンドンがん研究所がん免疫療法のチームリーダーであり、英国キングス・カレッジ・ロンドンの上級講師です。中皮腫と肺癌に対する新規CAR T細胞療法の開発、および免疫療法に対する反応マーカーを同定するためのこれらの悪性腫瘍の免疫生物学に焦点を当てています。このウェビナーでは、Klampatsa博士が、Compresstome®を用いて、免疫療法研究のための生体外モデルとしてプレシジョンカット腫瘍スライス（PCTS）をどのように作成したかについて説明しています。
生体外アッセイサービスのための精密切断組織スライスの作成
Visikol社は、高度なイメージング、3D細胞培養アッセイ、デジタルパソロジーを活用し、創薬・開発プロセスを加速させることに特化した受託研究サービス企業です。このウェビナーでは、Visikol社が、肝臓損傷を研究するためのin vitro肝臓モデルの必要性について説明します。精密切断肝切片（PCLS）を作製するための標準的なアッセイフォーマットを実演し、Compresstome® VF-310-0Z振動ミクロトームが、治療間で意味のある比較ができる均一な組織スライスを作製するのに役立つことを説明します。PCLSを作成するためのCompresstome®の使い方を順を追って説明します。
半厚膜脳スライスにおける高分解能蛍光イメージングへの迅速なアプローチ
この映像は、神経科学者が Compresstome® の組織スライサーを使い、イメージング研究のために脳のスライスを採取する様子を示しています。Compresstome®を使用する際、組織は検体チューブの中に埋め込まれます。検体チューブは、内側のプラスチック製プランジャーと外側の 金属製チューブの2つからできています。内側のプラスチック製プランジャーは、試料を装着する部分です。プランジャーを引き下げることで、組織サンプルが金属管内に埋め込まれます。
腫瘍のスライス：肺腫瘍スライス培養の試みからの考察
Tsilingiri博士は腫瘍免疫療法に取り組んでおり、Compresstome振動ミクロトームを使って、スライス培養における腫瘍組織と自己リンパ節細胞との相互作用を調べています。この研究は、EUが資金提供するコンソーシアムTumour-LNoC（Tumour-Lymph node on a chip）の枠組みの中で行われており、最終的な目標は、チップ上で転移プロセスを模倣し、転移細胞をリアルタイムでモニターすることです。
Compresstome®を用い二次元から三次元の病理組織学へ
Wong博士は、脳のような臓器全体の高速組織学的3Dイメージングのために、カスタムメイドのCompresstome®をどのように製作したかを紹介しています。
論文
Koveal D, Rosen PC, Meyer DJ, Díaz-García CM, Wang Y, Cai LH, Chou PJ, Weitz DA, Yellen G. A high-throughput multiparameter screen for accelerated development and optimization of soluble genetically encoded fluorescent biosensors. Nat Commun. 2022 May 25;13(1):2919. PMID: 35614105; PMCID: PMC9133083. PDFダウンロード
Parlakgül G, Arruda AP, Pang S, Cagampan E, Min N, Güney E, Lee GY, Inouye K, Hess HF, Xu CS, Hotamışlıgil GS. Regulation of liver subcellular architecture controls metabolic homeostasis. Nature. 2022 Mar;603(7902):736-742. Epub 2022 Mar 9. PMID: 35264794; PMCID: PMC9014868. PDFダウンロード
Wang C, Hyams B, Allen NC, Cautivo K, Monahan K, Zhou M, Dahlgren MW, Lizama CO, Matthay M, Wolters P, Molofsky AB, Peng T. Dysregulated lung stroma drives emphysema exacerbation by potentiating resident lymphocytes to suppress an epithelial stem cell reservoir. Immunity. 2023 Mar 14;56(3):576-591.e10. Epub 2023 Feb 22. PMID: 36822205. PDFダウンロード
関連製品
flexiVent
肺機能測定・解析
flexiVent肺機能測定・解析ソリューションは、in vivo呼吸力学測定のゴールドスタンダードとして広く知られています。従来の肺換気の抵抗とコンプライアンス力学を超え、中枢気道、末端気道、実質の力学的特性に関する重要な詳細を測定・解析します。
flexiVentは実験条件を精密にコントロールすることで、最高の感度と再現性を実現しています。
オレンジサイエンスはemka TECHNOLOGIESの日本総代理店であり、日本国内においてemka TECHNOLOGIES社との唯一の取引窓口です。
vivoFlow
呼吸機能解析
vivoFlowは無拘束での呼吸機能解析装置です。全身、ヘッドアウト、ダブルチャンバーでの呼吸機能解析を提供します。
プレチスモグラフィは、意識のある自発呼吸の実験室被験者の肺機能を研究するための標準的な方法です。気圧脈波法では、被験者が呼吸している間、薬物やその他の刺激にさらされる前後に生じる流量と圧力の変化を測定します。さまざまな被験者のサイズやタイプに容易に適応でき、被験者を連続した実験日に何時間も研究する縦断的研究によく使用されます。
