器官型スライス培養

器官型スライス培養は、生きた組織の薄片を、制御された条件下で試験管内で培養する技術です。神経科学や細胞生物学の研究において重要な手法で、従来の細胞培養よりも生理学的な観点から神経回路の構造と機能を研究することができます。組織切片は薄くフラットなサンプルを提供し、容易にスライスしてin vitroで培養できるため、器官型スライス培養に必要とされます。組織切片がなければ、特定の関心領域を分離して培養することは難しく、制御された環境で神経回路を研究することは困難となります。

Compresstome®ビブラトームの利点

生存細胞数の多さ：生存細胞数が多いため、スライス培養中の増殖がより良好になります。
メンテナンスが簡単：Auto Zero-Zはキャリブレーション不要のZero-Zを意味します。
使いさすさ：多くの研究室ではCompresstomeによって1回目または2回目で多くの生細胞を含むスライスを得ることができます。

従来の振動ミクロトームの問題点

組織や細胞の損傷：低速切断による組織の断裂や細断は、組織に大きな細胞損傷を与え、その後の組織の培養に支障をきたします。
メンテナンスとキャリブレーション：専門知識を必要とする時間のかかるメンテナンスが必要であったり、メンテナンスが性能低下につながる可能性があります。
習得の難しさ：特に組織調製に慣れていないユーザーにとっては、完璧に仕上げるにはかなりの練習が必要。

器官型スライス培養

器官型培養スライスは、細胞集団の3D細胞構造を保持し、短期および長期の実験操作が可能な利用しやすいシステムです。そのため、器官型スライス培養、特に神経科学用の脳スライス培養は、生理学研究における優れた手法となっています。

器官型スライス培養は、組織スライスを培地中で培養し、動物モデルの外で生存する必要があるため、細胞の生存が考慮すべき最も重要な基準となります。脳スライスの場合、ニューロンの生存性は、パッチクランプ電気生理を可能にするために極めて重要です。器官型脳スライスは、パッチクランプを容易に行えるよう、最上部の数細胞層内に生存ニューロンが高い比率で存在する必要があります。また、培養スライスをインキュベートする前に神経細胞が死滅するのを防ぐため、脳スライスを切断するプロセスは迅速に行う必要があります。したがって、このプロセスには、表面のニューロンを剪断することなく、高品質の急性脳スライスを素早く作成できるビブラトームが必要です。

器官型スライス培養 - 推奨モデル

VF-510-0Z

振動ミクロトームCompresstome® VF-510-0Zは特許取得済みの圧縮技術によりビビリ・チャタリングなしで切片を作製し、急性組織上の多くの生存細胞を維持。良質な実験結果を保証します。

従来のビブラトームの5倍の速さで切開し、ブレードを組織に当てる時間を短縮し、より良い切開を実現
Auto Zero-Zテクノロジーにより、Z軸のたわみを1 µm未満に低減
持ち運びに便利な軽量設計
完全自動化：切開＋厚み調整

VF-510-0Z

研究室での実例

Compresstome® による心臓研究のための生きた心筋スライスの切片化

James Smyth博士が率いるSmyth研究室では、心筋症をサブセルレベルで研究し、病気の心臓に正常な心機能を回復させるための治療介入の潜在的な標的を探しています。ここでは、Smyth博士がCompresstome®で生きた心筋スライスを切り出し、組織培養とカルシウムイメージングに使用する方法を紹介しています。

免疫療法研究におけるCompresstome®の使用

Astero Klampatsa博士（PhD）は、英国ロンドンがん研究所がん免疫療法のチームリーダーであり、英国キングス・カレッジ・ロンドンの上級講師です。中皮腫と肺癌に対する新規CAR T細胞療法の開発、および免疫療法に対する反応マーカーを同定するためのこれらの悪性腫瘍の免疫生物学に焦点を当てています。このウェビナーでは、Klampatsa博士が、Compresstome®を用いて、免疫療法研究のための生体外モデルとしてプレシジョンカット腫瘍スライス（PCTS）をどのように作成したかについて説明しています。

生体外アッセイサービスのための精密切断組織スライスの作成

Visikol社は、高度なイメージング、3D細胞培養アッセイ、デジタルパソロジーを活用し、創薬・開発プロセスを加速させることに特化した受託研究サービス企業です。このウェビナーでは、Visikol社が、肝臓損傷を研究するためのin vitro肝臓モデルの必要性について説明します。精密切断肝切片（PCLS）を作製するための標準的なアッセイフォーマットを実演し、Compresstome® VF-310-0Z振動ミクロトームが、治療間で意味のある比較ができる均一な組織スライスを作製するのに役立つことを説明します。PCLSを作成するためのCompresstome®の使い方を順を追って説明します。

腫瘍のスライス：肺腫瘍スライス培養の試みからの考察

Tsilingiri博士は腫瘍免疫療法に取り組んでおり、Compresstome振動ミクロトームを使って、スライス培養における腫瘍組織と自己リンパ節細胞との相互作用を調べています。この研究は、EUが資金提供するコンソーシアムTumour-LNoC（Tumour-Lymph node on a chip）の枠組みの中で行われており、最終的な目標は、チップ上で転移プロセスを模倣し、転移細胞をリアルタイムでモニターすることです。

精密切断肺スライス（PCLS）：肺疾患研究のための新しい生体外モデル

Koziol-White博士は、約20年にわたり気道機能研究のために開発・利用してきた精密切断肺スライスシステムの多用途性を紹介しています。

論文

Gavert N, Zwang Y, Weiser R, Greenberg O, Halperin S, Jacobi O, Mallel G, Sandler O, Berger AJ, Stossel E, Rotin D, Grinshpun A, Kamer I, Bar J, Pines G, Saidian D, Bar I, Golan S, Rosenbaum E, Nadu A, Ben-Ami E, Weitzen R, Nechushtan H, Golan T, Brenner B, Nissan A, Margalit O, Hershkovitz D, Lahat G, Straussman R. Ex vivo organotypic cultures for synergistic therapy prioritization identify patient-specific responses to combined MEK and Src inhibition in colorectal cancer. Nat Cancer. 2022 Feb;3(2):219-231. Epub 2022 Feb 10. PMID: 35145327. PDFダウンロード

Greier MDC, Runge A, Dudas J, Carpentari L, Schartinger VH, Randhawa A, Mayr M, Petersson M, Riechelmann H. Optimizing culturing conditions in patient derived 3D primary slice cultures of head and neck cancer. Front Oncol. 2023 Mar 30;13:1145817. PMID: 37064104; PMCID: PMC10101142. PDFダウンロード

Ruiz-Garcia H, Zarco N, Watanabe F, De Araujo Farias V, Suarez-Meade P, Guerrero-Cazares H, Imitola J, Quinones-Hinojosa A, Trifiletti D. Development of Experimental Three-Dimensional Tumor Models to Study Glioblastoma Cancer Stem Cells and Tumor Microenvironment. Methods Mol Biol. 2023;2572:117-127. PMID: 36161412. PDFダウンロード

論文リスト

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